2017-2020年大熊猫重组干扰素的研制数据集

大熊猫对犬瘟热病毒高度易感,感染后发病率和死亡率极高，因缺少有效药物治疗而导致死亡的事例时有报道，造成重大经济损失和不良影响。干扰素在抗病毒、抗肿瘤、免疫调节等方面具有良好的效果，在动物临床中也有使用干扰素制品来治疗一些病毒性疾病。大熊猫干扰素作为大熊猫感染犬瘟热病毒的专用药物，可用于大熊猫感染犬瘟热病毒的紧急救治和预防，降低其死亡率，还可用于提高圈养大熊猫的抵抗力，降低患病风险。本研究用大肠杆菌表达系统构建大熊猫干扰素蛋白表达菌株, 筛选高效表达的菌株，并进行干扰素的诱导表达、纯化和活性检测的初步研究，为大熊猫专用长效干扰素的开发及应用提供研究基础。本研究对大熊猫α-干扰素3亚型蛋白密码子进行原核表达优化，合成基因后，通过酶切、酶连、转化、蓝白斑筛选等一系列实验方法构建原核表达质粒BL21-pET32a-IFN-α3。通过诱导使蛋白以包涵体形式表达，收集包涵体进行蛋白的纯化及鉴定，最后通过239T-VSV和Vero-VSV系统进行体外蛋白活性的鉴定。研究结果表明，利用原核载体表达的大熊猫α-干扰素，在两种体外系统上均有抗病毒活性。