通过19F NMR同时测量多重氟标记对GB1稳定性的影响的相关研究数据

通过大肠杆菌天然生物合成途径将氟化氨基酸掺入蛋白质中，通常会产生异质性氟化蛋白。不同¹⁹F标记状态的蛋白质稳定性可能存在差异，但由于仅相差少数¹⁹F原子的氟化蛋白质混合物难以分离，这些差异的测量一直面临挑战。本研究通过同时向GB1蛋白中引入氟代苯丙氨酸（3-氟苯丙氨酸，3FF；或4-氟苯丙氨酸，4FF）与5-氟代色氨酸（5FW），利用¹⁹F核磁共振技术，实现了无需样品分离即可直接测量不同¹⁹F标记状态GB1蛋白稳定性的目标。实验结果显示：具有不同¹⁹F标记状态的4FF-5FW-GB1蛋白稳定性差异显著，其中4FF标记效率越高，蛋白稳定性越低；此外，F30与F52位点对GB1稳定性表现出协同效应。与此相反，3FF与5FW的联合取代对GB1稳定性则呈现微弱的稳定化作用。本研究建立了一种便捷的¹⁹F核磁共振方法，可同步评估氟标记对蛋白质稳定性的影响，为精准解析氟标记效应提供了新的技术路径。