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'构建基因编辑工具鼠,并用已知功能的致死基因验证体内基因敲除的有效性'的相关数据集

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中国科学院脑科学数据中心2023-12-11 更新2024-03-05 收录
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CRISPR-stop技术将蛋白质编码序列转化为终止密码子,从而在适当的位置产生了无效等位基因。CRISPR-stop在单细胞期合子中诱导产生Founder 0(F0)纯合突变体小鼠,这避免了小鼠繁殖并可作为非致命基因的快速筛选方法。然而哺乳动物25%的基因,其功能丧失会导致早期死亡。在这里,我们在二细胞期合子中的一个细胞进行CRISPR-stop操作,一种我们称之为嵌合型CRISPR-stop的方法,产生嵌合Atoh1和Sox10 F0小鼠,这些小鼠不仅存活的时间比常规Atoh1/Sox10敲除小鼠时间久,而且也显示出公认的耳蜗表型。此外,通过使用嵌合型CRISPR-stop技术,我们发现了另一种以前未知的致死基因Rbm24在耳蜗外毛细胞(OHCs)存活中的作用,并通过Rbm24条件敲除模型进一步验证了Rbm24对OHCs的重要性。总之,我们的研究结果表明,嵌合型CRISPR-stop技术是可靠和快速的,我们相信这种方法将有助于在小鼠内耳和其他器官中快速筛选发育致死基因。
提供机构:
中国科学院脑科学数据中心
创建时间:
2023-12-11
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