酶定向进化筛选数据集

采用酶标仪Biotek SYNERGY H1对酶标板中不同突变体库进行筛选。首先通过易错PCR和定点饱和突变等手段构建突变体酶库，置于LB固体平板上培养至形成明显单菌落，分别挑取单菌落置于96孔板中培养并诱导表达，通过高速离心收取菌体后，加入溶菌酶和DNA酶（溶解在测活缓冲液中）使菌体破裂，将酶释放到上清溶液中，定量吸取上清与底物、辅酶混合于酶标板中，通过酶标仪采集一段时间内340 nm处（辅因子特征吸收峰）吸光度的变化值数据，通过软件Gen5 CHS 3.08分析比较酶标板每一个孔吸光值变化的差值以及速率，挑选变化差值最大或者速率最快的突变体接摇瓶扩大培养，并对其进行进一步表征确定。