Hodowla keratynocytów wyprowadzonych ze środkowych fragmentów mieszka włosowego (2)

Celem badania było uzyskanie keratynocytów wyprowadzonych ze środkowych fragmentów mieszka włosowego. W eksperymencie użyto mieszków włosowych, izolowanych ze skóry czterotygodniowych samic szczurów szczepu Wistar Albino Glaxo. Hodowle po 48-godzinnej stymulacji jonami wapnia płukano PBS i utrwalano 2,5 % roztworem glutaraldehydu w 0,1 M buforze kakodylowym o pH 7,4 (Sigma) w temperaturze pokojowej przez godzinę. Następnie hodowle zdrapywano z plastiku, płukano buforem kakodylowym i utrwalano dodatkowo w 1 % kwasie osmowym w 0,1 M buforze kakodylowym przez 1,5 h. Uzyskaną peletkę odwadniano i zatapiano w żywicy epoksydowej (Polysciences, Inc. Eppelheim, Niemcy). Ultracienkie skrawki kontrastowano octanem uranylu oraz cytrynianem ołowiu. Dokumentacja zdjęciowa powstała przy użyciu mikroskopu elektronowego Jeol 100S. Na zdjeciach keratynocyty wyprowadzone ze środkowego fragmentu mieszka włosowego, hodowane w pożywce standardowej; (a) na fotografii widoczne jądro komórkowe o regularnym kształcie, otoczone pasmami filamentów, układających się równolegle do otoczki jądrowej (strzałka); (b) dwie przylegające do siebie komórki, strzałkami zaznaczono desmosomy; powiększenie: (a) 7500x, (b) 5000x.