溶液及类细胞环境调控酶活和动态构象分子机制的酶催化过程中活性位点处基团间的弱相互作用实验数据

团队发展了19F-MQF-JR 序列，利用多量子滤波-INEPT技术，将酶反应中心引入的19F 探针与远程1H/13C/15N之间的微弱J 耦合（<15 Hz）转化为可测的极化转移衰减，率先成功解析出金属酶RR468 中F···H-N、F···H-O 及F···NH3+三类氢/离子键，得出2hJNF、化学位移及pH依赖性。该方法为氟标记酶蛋白的构象-功能研究提供了通用工具。同时，针对“水桥”寿命短、交换快的难题，将超冷技术与15N-横向弛豫扰动相结合，通过操控偶极-CSA交叉相关及量子相干路径，选择性增强与水分子直接成键的NH/NH2的R2，首次发现腺苷酸激酶AdK的Q2 侧链NH2通过两种水桥构型与G14主链成键，显著提高近攻击构象（NAC）比例，为NAC理论提供了原子级实验证据。