子房注射法转化‘紫宝石’蝴蝶兰的研究

采用子房注射法对‘紫宝石’蝴蝶兰进行外源DNA导入研究，结果表明：不同时期注射和不同注射处理方式对‘紫宝石’蝴蝶兰的落果率影响不同，对胚座组织和种子的GUS染色率的影响也不同，在授粉后65 d时，以2% DMSO为缓冲液，注射400 μg/mL浓度质粒，种子的GUS染色率最高达6.14%。选取各注射时期无菌播种后获得的1 000个原球茎，经系列浓度的潮霉素筛选，结果发现授粉后65 d注射时获得的抗性植株最多，为31株，转化率为3.1%。切取转化植株幼叶及幼根进行GUS检测，均为阳性；随机挑选7株幼苗进行PCR检测，均能扩增出GUS基因和HPT基因条带，说明外源基因已经整合到植株的基因组内。此研究为兰科植物育种提供了一种简单高效的途径。