红叶石楠良种选育及沙冬青抗寒基因克隆与新种质创制

1.选育了‘鲁宾斯红叶石楠抗寒良种。从引种驯化红叶石楠变异群体中，初选出多年在泰安从未受过严重冻害植株80株，经对比试验，筛选出山东泰安自然条件下越冬枝叶冻害死亡率平均在10%以下，整株没有死亡现象 春天从3月8号开始萌动，较对照提早6天 整个品种在自然生长状况下的红叶期为168天，较对照延长了13天。利用一年生枝条，扦插平均生根率92.0%，双舌接成活率达78%，劈接成活率为62％。2008年通过山东省林木良种审定鲁S-ETS-PG-011-2008，定名为‘鲁宾斯红叶石楠。2.采用分子克隆方法(cDNA-AFLP 和RACE)在国际上率先从沙冬青中克隆出了木本植物抗寒基因AmEBP1和AmGS，申报了国家发明专利，“沙冬青抗寒基因AmEBP1”专利号：DQ519359，已公示 “沙冬青抗寒基因AmGS”申请国家发明专利号：DQ519361，已公示，有关论文已发表在《Plant Molecular Biology》、《Preparative Biochemistry & Biotechnology》和《Gene》上。3.建立了高效红叶石楠再生体系和高效基因转化技术体系 通过对转基因株系进行了PCR、Southern、RT-PCR分析，证实AmGS基因已经整合到转基因红叶石楠基因组DNA中，且在转录水平表达 对转基因株系连续6次扦插继代植株进行了PCR测定，导入的AmGS基因在继代植株中能够稳定地传递下去。4.通过对转基因株系与未转基因株系抗寒性及生理对比检测，获得了4个抗寒性明显提高的转基因组培苗株系（R3， R5， R6，R7）。它们的株LT50都明显低于未转基因对照植株（低4℃左右）。