木材的腐朽菌PCR快速檢測技術建立

木材腐朽菌的鑑定技術與木材的保存及腐朽菌的研究息息相關，而了解侵入木材的腐朽菌種類，對於停止與防止腐朽菌破壞木材上亦相當重要。傳統木材腐朽菌的鑑定，是利用真菌的子實體、菌絲與孢子型態及菌絲的生長條件來辨認，但此方法需要專業知識與較多經驗，誤認的情況很難完全避免。現今利用分子生物技術作為鑑定真菌的方法已相當普遍，但在木材腐朽菌方面之仍未有相當的發展。本研究目的為應用生物技術開發木材腐朽菌快速檢測方法，利用聚合酶鏈鎖反應﹙PCR﹚快速診斷技術，達到高敏感度之檢測與鑑定的目的，用以早期診斷室外木結構腐朽，以期防患未然。本研究收集國內常見木材腐朽菌菌種（5種菌株）及在空氣中存在之微生物（不會引起腐朽但在木材上常見之菌株，提供PCR技術建立之對照組）共計10種（Gloeophyllum trabeum、G. sepiarium、G. abietinum、Trametes versicolor、Lentinus lepideus、Aspergillus niger、A. restrictus、Chaetomium globosum、Cladosporium cladosporioides、C. herbarum），分別完成各菌種收集、分離、鑑定及保存。同時也完成搜集10種菌株在國內外有關其基因序列文獻資料，完成其分子DNA資料庫建立，基因序列分析及各菌株引子對設計。研究中針對5種木材腐朽菌設計之通用性及專一性引子對，其中針對G. trabeum、G. Sepiarium、L. lepideus 及 T. versicolor四木材腐朽菌的專一性引子對PCR反應成效良好，各引子對之靈敏度可達 2-13 pg且專一性亦十分良好；唯有針對G. abietinum之引子對專一性及靈敏度（24.8 g）不及其餘菌種引子對，需搭配另一引子對來達到鑑定成效。將本研究中所設計之引子對嘗試應用於實際檢測試驗，初步對接種G. trabeum、L. lepideus 及 T. versicolor的植物樣本核酸反應成效良好，透過建立高敏感度的分子檢測技術，將有利於未來木材腐朽菌造成病害之鑑定與防檢疫工作。