การพัฒนาวิธีตรวจคัดกรองการดื้อต่อโคลิสตินของเชื้อ Escherichia coli และ Klebsiella pneumoniae ด้วยเทคโนโลยีอนุภาคนาโนทองคำ

เชื้อ Escherichia coli และ Klebsiella pneumoniae เป็นเชื้อก่อโรคสำคัญที่มีแนวโน้มการดื้อยาต้านจุลชีพเพิ่มสูงขึ้นอย่างต่อเนื่อง รวมถึงการดื้อยาโคลิสตินซึ่งเป็นยาทางเลือกสุดท้าย การตรวจคัดกรองการดื้อโคลิสตินอย่างรวดเร็วและแม่นยำจึงมีความจำเป็นในห้องปฏิบัติการจุลชีววิทยาคลินิก การศึกษานี้ มีวัตถุประสงค์เพื่อพัฒนาวิธีการคัดกรองการดื้อโคลิสตินใน E. coli และ K. pneumoniae โดยใช้อนุภาคทองคำขนาด 20 นาโนเมตร (AuNPs) และเปรียบเทียบประสิทธิภาพกับวิธีมาตรฐาน Broth Microdilution (BMD) รวมถึงประเมินประสิทธิภาพของการทดสอบ Rapid Polymyxin NP (RPNP) และระบบอัตโนมัติ MicroScan ในการศึกษา ผู้วิจัยทำการศึกษาความเข้มข้นของโคลิสตินที่เหมาะสมในการจำแนกการดื้อยา colistin กับเชื้อมาตรฐานและเชื้อที่ทราบความไวต่อ colistin จากนั้นทำการทดสอบแบคทีเรียจำนวน 158 ไอโซเลต (85 E. coli และ 73 K. pneumoniae) โดยประเมินความไวต่อโคลิสตินด้วยวิธี AuNPs, RPNP, MicroScan และเปรียบเทียบกับ BMD นอกจากนี้ยังตรวจหา mcr-1 gene ด้วยเทคนิค PCR ในไอโซเลตที่มีค่า MIC ≥2 µg/mL การทดสอบด้วย AuNPs มีความไว (Sensitivity) ร้อยละ 80.33 และความจำเพาะ (Specificity) ร้อยละ 38.14 มีความสอดคล้องเชิงหมวดหมู่ (Categorical Agreement: CA) ร้อยละ 54.43 อัตราความผิดพลาดประเภท Major Error (ME) ร้อยละ 61.86 และ Very Major Error (VME) ร้อยละ 19.67 สะท้อนว่าขั้นตอนนี้ยังไม่เหมาะสมสำหรับการนำไปใช้ในทางคลินิก ในขณะที่ RPNP และ MicroScan มีค่า CA เท่ากันที่ร้อยละ 96.8 โดย RPNP มี Sensitivity ร้อยละ 98.36 และ Specificity ร้อยละ 95.88 ส่วน MicroScan มี Sensitivity ร้อยละ 95.08 และ Specificity ร้อยละ 97.94 อย่างไรก็ตาม RPNP มีอัตรา ME สูงกว่า (4.12%) ในขณะที่ MicroScan มี VME สูงกว่า (4.92%) จากการตรวจหา mcr-1 gene ด้วย PCR พบในเชื้อ E. coli จำนวน 5 ไอโซเลต การศึกษานี้แสดงให้เห็นว่า แม้ว่าวิธี AuNPs ที่พัฒนาขึ้นนี้สามารถตรวจได้ง่าย รวดเร็ว และมีต้นทุนต่ำ แต่ยังต้องมีการพัฒนาเพิ่มเติมก่อนนำไปใช้ในทางคลินิก สำหรับการทดสอบด้วย RPNP และ MicroScan เป็นทางเลือกที่เหมาะสมในการคัดกรองการดื้อโคลิสตินในเบื้องต้น แต่ควรมีการยืนยันผลด้วยวิธีมาตรฐานในกรณีที่ได้ผลบวกต่อไป