半滑舌鳎一个saposin家族蛋白的抗菌活性及其机制

半滑舌鳎（Cynoglossus semilaevis）是中国海水鱼类养殖业中重要的养殖品种。目前，细菌等微生物病害严重威胁半滑舌鳎养殖业的发展。开展半滑舌鳎抗菌因子的研究，有利于开发绿色安全的病害防治手段，以促进水产养殖业的健康发展。Prosaposin（PSAP）最初被鉴定为一种前体蛋白，在内质网合成后被转运至溶酶体内，被剪切加工成四种不同的Saposin（SAP）蛋白，分别为SAP A、B、C和D，主要作用是激活溶酶体中鞘脂降解所必需的鞘脂水解酶。在人和小鼠中，PSAP 和 SAPs广泛分布于多种器官、组织和分泌液中，发挥不同的作用。一些 SAP 蛋白家族成员，如溶粒素（granulysin）和NK-Lysin等，被发现具有抗菌活性。目前，硬骨鱼 SAP 家族蛋白的免疫功能研究相对较少。本研究在半滑舌鳎中发现了一种含一个 SAP A 域和两个 SAP B 域的蛋白，将其命名为 CsSDP。将 CsSDP 在 HEK293T 细胞中表达时，发现其特异性定位于溶酶体中。当 CsSDP 在大肠杆菌中过表达时，能明显抑制细菌生长，且抑制作用依赖于 SAP A 和 SAP B 结构域中的两个特定区域。来自 SAP A 和 SAP B 结构域的两个多肽( P32 和 P30 )可以结合革兰氏阴性和革兰氏阳性细菌，并抑制其生长。超微结构分析表明，P32 和 P30 主要通过破坏细菌细胞壁、造成细胞质内容物的大量释放而杀灭靶细菌。这些结果对硬骨鱼 SAP 家族蛋白的免疫功能提供了新的认知。