การพัฒนาการตรวจวิเคราะห์เชื้อ Escherichia coli อย่างรวดเร็ว

การศึกษาครั้งนี้มุ่งเน้นไปที่การวัด ?-glucuronidase (GUD) activity ของเชื้อ Escherichia coli (E. coli) เพื่อนำมาใช้ในการพัฒนาชุดตรวจวิเคราะห์เชื้อ E. coli อย่างรวดเร็ว โดย GUD activity เป็นปฏิกิยาที่เกิดขึ้นจากเอนไซม์ ? -glucuronidase (GUD) ที่ผลิตขึ้นโดยเชื้อ E. coli ซึ่งจะสามารถย่อยสารประกอบฟลูออเรสเซนต์ 4-methylumbeferyl- ? -D-glucuronide (MUG) ได้เป็น fluorescent 4-methylumbelliferone โดยจะเกิดการเรืองแสงภายใต้คลื่นแสง Ultraviolet (UV) ที่ช่วงความยาวคลื่น 306-360 nm การศึกษาครั้งนี้จึงได้มีการนำสารละลาย MUG มาเจือจางที่ความเข้มข้น 4 ระดับคือ 25 mg/mL, 50 mg/mL, 100 mg/mL และ 150 mg/mL มาเติมลงในอาหารเหลว NB และบ่มร่วมกับ E. coli 3 isolates, Salmonella spp. และ Staphylococcus aureus ที่อุณหภูมิ 37?C, 16 ชั่วโมง ผลการศึกษาพบว่าสารละลาย MUG ทุกความเข้มข้นในอาหารเหลว NB ที่บ่มร่วมกับ E. coli 3 isolates ให้ผล GUD activity เป็นบวกและสามารถสังเกตปฏิกิริยาได้อย่างชัดเจน ส่วนการบ่มร่วมกับเชื้อ Salmonella spp. และ Staphylococcus aureus ให้ผล GUD activity เป็นลบ อย่างไรก็ตาม แม้ความเข้มข้นของสารละลาย MUG ต่ำที่สุดที่สามารถสังเกต GUD activity ได้อย่างชัดเจนคือที่ความเข้มข้น 25 mg/mL แต่การปิเปตสารในปริมาตรน้อยจำเป็นต้องฝึกฝนและใช้ความชำนาญ ซึ่งอาจะเกิดความผิดพลาดจนเกิดผลลบปลอม (false negative) ได้ ดังนั้นผู้วิจัยจึงแนะนำให้ใช้สารละลาย MUG ที่ความเข้มข้น 50 mg/mL เพื่อความแม่นยำและลดการเกิดผลลบปลอมในการทดสอบ การศึกษาครั้งนี้จึงเป็นการพัฒนาวิธีการตรวจวิเคราะห์เชื้อ E. coli โดยใช้ สารละลาย MUG ในปริมาณน้อย และสามารถตรวจตัวอย่างได้จำนวนมากในการทำงาน 1 ครั้ง จึงเป็นวิธีการตรวจที่มีค่าใช้จ่ายถูกลงและตรวจตัวอย่างได้จำนวนมากในเวลาอันรวดเร็ว