表达Asia I型口蹄疫病毒VP1基因的重组布鲁氏菌及其疫苗的生产方法

一种表达AsiaⅠ型口蹄疫VP1基因的粗糙型布鲁氏菌的生产菌株，其特征在于采用非抗性筛选技术，用密码子优化的AsiaⅠ型江苏株（JS）VP1基因替代布鲁氏菌S2菌株wboA基因1-897bp之间的序列，构建了能够表达AsiaⅠ型VP1基因的重组布鲁氏菌rS2-JS株，该重组菌不仅能够良好地表达AsiaⅠ型VP1基因，而且使原始菌株由光滑型转变为了粗糙型，用该菌制备的疫苗免疫动物后，其血清可用常规的凝集试验与自然感染相区分，本菌株已于2010年9月送交中国微生物保藏委员会普通微生物保藏中心，保藏号为：CGMCC No. 4192 。
一种布鲁氏菌活疫苗的生产方法，其特征在于用胰大豆肉汤作为重组菌的培养基，灭菌后按培养基量的按1％～2％接入布鲁氏菌rS2-JS株种子菌液，37℃，按常规方法发酵培养28～38h，加入兽用生物制品常用的蔗糖明胶稳定剂，充分混匀、分装疫苗瓶中后经冷冻真空干燥，即成为布鲁氏菌病-口蹄疫AsiaⅠ型rS2-JS疫苗。