Evaluación dinámica de las células mesenquimales, las vesículas extracelulares y el sistema inmune en pacientes críticos de cuidados intensivos: de la fisiopatología al potencial tratamiento

En el presente proyecto se evaluaron 50 pacientes con síndrome derespuesta inflamatoria sistémica (SIRS) ingresados en nuestra Unidad de Cuidados Intensivos-UCI- (25 pacientes con SIRS secundario a politrauma y 25 con SIRS de otro origen) de unaforma dinámica y multiparamétrica, evaluándose el papel del sistema inmune innato, múltiplescitocinas y factores humorales, las células mesenquimales (MSC) y las vesículas extracelularescirculantes; además, se evaluó in vitro la capacidad inmunomoduladora y antiinflamatoria delas MSC de donante sano bajo estos estímulos.Los objetivos específicos del proyecto fueron:1. Analizar en diferentes momentos un número elevado de subpoblaciones celulares delsistema inmune innato (mediante citometría de flujo de nueva generación) y múltiplescitocinas, quimiocinas y otros factores (mediante tecnología Luminex) que estabanpotencialmente involucradas en el SIRS.2. Cuantificar el número de vesículas extracelulares circulantes (mediante análisis denanopartículas) y su contenido en microRNA (mediante arrays) en estos pacientes.3. Cuantificar las MSC circulantes mediante citometría de flujo en diferentes momentos yevaluar el perfil transcriptómico (mediante RNAseq) de MSC analizadas en fresco ypurificadas mediante sorting (FACS) en pacientes con SIRS.4. Analizar si existían diferencias entre los pacientes con SIRS secundario a politrauma ylos pacientes con SIRS de otro origen.5. Correlacionar todos estos hallazgos biológicos con parámetros clínicos y analíticosestándar, diversas escalas (p. ej. APACHE, SOFA) y la evolución (supervivencia, estanciaen UCI, calidad de vida, etc.).6. Además, evaluamos la capacidad inmunomoduladora y antiinflamatoria de MSC sanasco-cultivadas con células inmunes activadas (mediante citocinas que comprobamosque estaban elevadas en SIRS o con vesículas extracelulares de pacientes con SIRS),midiendo la proliferación tras el co-cultivo mediante citometría de flujo ycuantificando la liberación de citocinas al sobrenadante mediante Cytometric BeadArrays (CBA).