山核桃良种快繁关键技术及其产业化

本项目为森林培育学、经济林学领域的基础研究及应用基础研究。项目围绕浙江特色干果山核桃良种快繁，开展嫁接成活机理、体细胞胚胎发生等基础研究，形成了良种快繁关键技术体系，实现了山核桃良种的产业化。主要研究内容如下：1、山核桃良种快繁关键技术及其产业化研究。开展了山核桃采穗圃营建、砧木筛选、异砧嫁接、大苗培育等技术的研究，集成了嫁接苗产业化技术体系 山核桃嫁接产业化生产采用嫁接成活率高、愈合好的湖南山核桃砧木，嫁接成活率达到92.66%，接株当年生长量超过90 cm，造林保存率高达93.78%，缓苗期短、生长量大。系统研究了苗期营养动态变化，提出了营养快速诊断等大苗培育技术。3、山核桃不定芽再生和体胚发生技术研究。研究了胚龄、基本培养基、植物生长调节物质（BA、TDZ、2，4-D、picloram、NAA、IBA）种类和浓度对幼胚萌发、不定芽增殖、生根，胚性愈伤组织诱导、体胚发生、萌发等的影响，建立了不定芽组培再生体系和体胚发生体系，研发了不定芽的二步生根培养法，发现体胚发生经历了类似于合子胚的发育过程，即球形胚、心形胚、鱼雷胚以及子叶胚。3、山核桃嫁接成活机理研究。采用扫描电镜和免疫金定位技术研究了嫁接愈合过程，发现嫁接愈合过程中嫁接面愈伤组织细胞IAA的免疫反应特异性强，明确了砧穗质体中束缚态IAA的释放是启动砧穗愈合的主导因子IAA启动愈伤反应，形成愈伤组织，并进一步分化形成维管组织 用RACE和cDNA-AFLP技术得到山核桃嫁接过程中的20个差异TDFs，克隆到水通道蛋白基因CcPIP和生长素响应基因CcARF，分析了其在嫁接成活过程中的表达情况及其调控网络，从形态、生理生化和分子水平揭示了山核桃嫁接成活机理。