镜像核酸指标第三方测试数据

数据集主要内容为“分割设计”大型蛋白合成策略，成功全化学合成了大型高效、高保真的镜像 DNA 聚合酶，突破了全化学合成的蛋白质分子量上限。以该镜像 DNA 聚合酶为基础的镜像 PCR 扩增和组装技术可实现长度为 1.5 kb 的 16S rRNA 镜像基因的准确合成，为长链镜像核酸的制备开辟了新的途径。型蛋白化学合成面临的主要问题之一是化学合成后期反应多肽底物的不足以及基于 HPLC 的纯化方式无法满足较大片段之间的分离要求。我们使用“分割设计”合成策略，基于前人发现的 P DNA 聚合酶分裂型突变体，成功实现了大型高保真天然及镜像 split P DNA 聚合酶的全化学合成。此合成策略的应用避免了传统化学合成后期中常见的反应物投入难以达到反应要求的最佳浓度的情况，同时也免除了合成后期超长蛋白片段(几百个氨基酸)的连接和纯化步骤，缩短了合成时间并减少了操作和纯化中的系统损失另外，使用硫代磷酸化学法，借助化学合成的镜像 DNA 聚合酶完成了长度为 203 bp 的镜像 DNA 片段的序列测定。利用合成的镜像 DNA 聚合酶发展出了镜像 DNA 的边合成边测序(sequencing-by-synthesis)技术，进一步丰富了镜像生物学领域的研究手段。相比于镜像核酸化学测序技术，该测序技术的实验操作更加简便易行;可用于测定镜像核酸适配体的碱基序列，为镜像核酸分子在疾病诊断和治疗方面的应用奠定了基础。