水凝胶生物安全性数据

采用细胞相容性和血液相容性评价水凝胶的生物相容性。首先，采用MTT法(#M8180, Solarbio)评估水凝胶对L929手部HMrSV5细胞(Bluefcell生物技术开发有限公司)的细胞毒性。简而言之，将L929或HMrSV5细胞以1 × 104个/孔的比例接种于96孔板中。将水凝胶粉末溶于DMEM中，制备不同浓度(50、100、200、400、800 μg/mL)的给药培养基。孵育24 h后，将DMEM培养基替换为加药培养基，以原DMEM中的细胞为对照。24 h后，换入100 μL MTT溶液(0.5 mg/mL)， 37℃孵育4 h。随后丢弃MTT溶液，每孔加入150 μL二甲亚砜(DMSO)。摇匀板并将其转移到带有492 nm滤光片的微孔板读取器(Bio-Rad, Berkeley, CA)中读取吸光度。以最高浓度的给药培养基(800 μg/mL)孵育的L929和HMrSV5细胞，用Calcein-AM/PI活/死细胞荧光染色试剂盒(#G1707, Servicebio)染色，在倒置荧光显微镜(Olympus FV3000)下观察，对照为TCPS。