N-linked glycosylation of GETV envelope proteins affect viral infection and pathogenicity

盖塔病毒（GETV）是一种新兴的蚊媒病原体，宿主范围广泛，对牲畜和公共健康构成重大威胁。尽管其包膜蛋白上可能存在N-连接糖基位点，但其具体功能作用尚未被表征。本研究通过针霉素抑制测定表明GETV的复制依赖于宿主糖基化机制。酶解揭示包膜蛋白E1和E2携带复杂型N连接糖链，这些糖链对感染性至关重要。通过构建包膜蛋白N连接糖基化位点突变体，发现E1-N141位点影响病毒进入，而E2-N262位点对病毒吸附和入侵都至关重要。所有包膜蛋白N连接糖基位点的突变损害了后代病毒的感染性，导致复制动力学延迟并显著降低病毒滴度。在ICR小鼠模型中，所有突变体均表现出减弱的致病性，其中E2-N200突变带来了最显著的毒力降低。值得注意的是，尽管毒力降低，一些突变体（E1-N141A和E2-N200A/N262A）诱导的中和抗体反应强于野生型病毒，并对野生型GTV的后续挑战提供了完全保护。这些发现凸显了包膜蛋白糖基化在GETV感染性和致病机制中的关键作用，为合理的疫苗设计提供了分子基础。