การตรวจหาเอนไซม์คาร์บาพีเนมเมสที่สร้างจากเชื้อ Pseudomonas aeruginosa อย่างรวดเร็วด้วยเครื่อง matrix-assisted laser desorption ionization-time of flight mass spectrometry

การสร้างเอนไซม์คาร์บาพีเนมเมสของเชื้อ Pseudomonas aeruginosa เป็นสาเหตุสําคัญที่ ก่อให้เกิดโรคติดเชื้อในโรงพยาบาลและเป็นสาเหตุทําให้อาการของผู้ป่วยมีความรุนแรงขึ้นหรือต้องอยู่ ในโรงพยาบาลนานขึ้น การเพิ่มของเชื้อ P. aeruginosa ที่ดอ้ื ต่อยากลุ่ม carbapenems ซึ่งเป็นยาที่ มีฤทธิ์ในการฆ่าเชื้อสูงและเป็นยาในกลุ่มทางเลือกสุดท้ายที่ใช้กันอย่างแพร่หลาย อาจทําให้เกิดการ ถ่ายทอดยีนดื้อยาข้ามสายพันธุ์ได้ เทคนิคการตรวจที่รวดเร็วและแม่นยําเป็นข้อมูลเบื้องต้นที่สําคัญ สําหรับการรักษาที่เหมาะสม จุดมุ่งหมายของการศึกษานี้คือการหา specific spectrum ในเชื้อ P. aeruginosa ที่ดื้อต่อยาในกลุ่ม carbapenems โดยใช้หลักการ carbapenemase activity ด้วย เครื่อง MALDI-TOF MS โดยทดสอบกลุ่มเชื้อ P. aeruginosa ที่ดื้อต่อยากลุ่ม carbapenems และ เชื้อที่ไวต่อยากลุ่ม carbapenems จํานวนกลุ่มละ 81 สายพันธุ์ รวม 162 สายพันธุ์ โดยเชื้อกลุ่มที่ดื้อ ยา carbapenems จํานวน 81 สายพันธุ์ ผ่านการทดสอบหายีน blaIMP, blaVIM ที่ควบคุมการสร้าง เอนไซม์ carbapenemase ด้วยวิธี PCR และตรวจหาการ hydrolysis ของยา imipenem ดู สเปกตรัมของยาที่เปลี่ยนไปด้วย MALDI-TOF MS ผลการศึกษาพบเชื้อ CPPA จํานวน 39 สายพันธุ์ คิดเป็นร้อยละ 48 ผลการศึกษาด้วยเทคนิค MALDI TOF MS พบว่าเชื้อที่ไวต่อยากลุ่ม carbapenems 81 สายพันธุ์ พบ mass spectrum ที่เป็นตัวแทนของยา imipenem ที่ peak 300(1)(2)m/z จํานวน 42 สายพันธุ์ คิดเป็นร้อยละ 51.8 นั่นเพราะเชื่อไม่มีการสร้างเอนไซม์ carbapenemase และกลุ่มเชื้อที่ดื้อต่อยากลุ่ม carbapenems พบ mass spectrum ที่ peak 274 m/z จากการที่เชื้อ มีการสร้างเอนไซม์ cabapeneamase ไปสลายโครงสร้างทางโมเลกุลของตัวยา imipenem จํานวน 39 สายพันธุ์คิดเป็นร้อยละ 48.2 เมื่อนํามาเปรียบเทียบกับวิธีปฏิกิริยาลูกโซ่พอลิเมอเรส พบว่า เทคนิค MALDI-TOF MS มีความไวและความจําเพาะร้อยละ 90.7 และ 97.4 ตามลําดับ และค่า ทํานายผลบวกลวงและผลลบลวงเท่ากับร้อยละ 97.5 และ 90.5 ตามลําลําดับ การตรวจหาเอนไซม์ carbapenemase ของเชื้อ P. aeruginosa ด้วยวิธีปฏิกิริยาลูกโซ่พอลิเมอเรสมีความสัมพันธ์กับการ ตรวจด้วยเทคนิค MALDI-TOF MS มีค่า P < 0.001 ที่ระดับนัยสําคัญ 0.05 และให้ผลสอดคล้องกัน ทั้งสองวิธีมีค่า Kappa เท่ากับ 0.877 ดังนั้นจากผลการศึกษาด้วยเทคนิค MALDI-TOF MS นั้นมี ความรวดเร็ว แม่นยํา น่าเชื่อถือสามารถนํามาประยุกต์ใช้ในการตรวจหาการสร้างเอนไซม์ carbapenemase ของเชื้อ P. aeruginosa ได้