杨树原生质体环状RNA过表达体系的构建方法及应用

通过设计背靠背引物在RNase R消化过的样品中检测出候选环状RNA，并利用瞬时转化技术，在杨树次生木质部原生质体进行环状RNA过表达研究其功能。主要包括以下步骤：杨树次生木质部环状RNA的分子生物学检测；环状RNA过表达重组质粒的构建；PEG介导重组质粒转化杨树原生质体环状RNA过表达情况的分子生物学检测；验证其对宿主基因转录通过过量表达circ-IRX7，检测到R-loop结构增加，并影响了宿主基因的选择性拼接，而对照则没有变化，为后续研究环状RNA的转录后调控功能提供了初步的线索。相关材料已提交国家发明专利申请。