松材线虫SCAR标记与系列分子检测技术及试剂盒研制

本课题通过松材线虫与拟松材线虫、其它线虫之间的遗传差异，筛选出了松材线虫、拟松材线虫的特异RAPD片段、SCAR标记片段和相应的随机引物、SCAR特异引物，标记出了松材线虫非放射性杂交探针，设计、合成了松材线虫实时定量PCR的特异引物与探针，成功构建了松材线虫SCAR标记检测试剂盒、实时定量PCR检测试剂盒以及杂交检测试剂盒，开发出了一系列实用的松材线虫分子快速检测和鉴定技术与方法。 本课题首次成功地从线虫遗传物质入手，为松材线虫检疫鉴定建立了一套准确有效的分子标记系统，克服了传统的形态鉴定需时长、鉴定难度大、不能对幼虫和雄虫进行鉴定等的不足，实现了对松材线虫幼虫、雌雄成虫均可进行检测鉴定的目标，为松材线虫病新疫区疫点的确定和防止疫木的传播提供了快速、准确和安全的松材线虫鉴定和检测方法，具有很强的实用性。其检测手段先进，数据翔实可靠，检测结果易于判读，准确性达100%。鉴定委员会认为，该项目技术先进，创新性强，总体技术水平达到同类研究的国际先进水平。