'通过体内递送迷你 dCas 13X 衍生的 RNA 碱基编辑器改善常染色体显性遗传性听力损失'

可编程RNA编辑工具能够可逆地纠正突变转录本，从而降低与使用DNA编辑工具相关的永久性基因改变的潜在风险。然而，RNA工具治疗疾病的潜力尚不清楚。本研究中，我们评估了基于Cas13的RNA碱基编辑器在肌球蛋白VIp.C442Y杂合突变（Myo6C442Y/+）小鼠模型中的RNA矫正治疗效果，该模型可模拟人类显性遗传聋的表型。我们首先在培养细胞中筛选了几种基于Cas13的RNA碱基编辑器和针对Myo6C442Y的指导RNA (gRNAs)，发现由截短的Cas13X.1和RNA腺苷脱氨酶结构域变体(ADAR2ddE488Q)构成的基于迷你dCas13X.1的腺苷碱基编辑器(mxABE)，具有高效的A>G转换效率和低脱靶频率。单个腺相关病毒(AAV)介导的mxABE在耳蜗中将突变的Myo6C442Y基因纠正为Myo6WT基因，并在Myo6C442Y/+小鼠的注射耳蜗中增加了Myo6WT基因。这种治疗恢复了听觉功能，包括听觉脑干反应和失真产物耳声发射，直到Myo6C442Y/+小鼠注射AAV-mxABE-Myo6后3个月。我们还观察到，与未经处理的对照耳相比，经处理的耳中毛细胞存活率更高，毛束形态退化程度更低。这些发现为RNA编辑工具作为各种半显性形式的听力损失和其他疾病的治疗方法提供了概念验证研究。