Metformin exacerbates diabetic amyotrophy through "oxidative stress-microbiota."

利用STZ诱导糖尿病SD大鼠模型，探索二甲双胍（MET）加重糖尿病肌萎缩症（DA）的靶点及其机制。方法：MET的目标通过包括HIT和TCMSP在内的10个数据库获得。DA靶点通过基因卡数据库获得。相关目标被导入Venny平台绘制文恩图，并对其交点进行可视化。利用STRING和DAVID数据库及Cytoscape软件建立了靶点蛋白相互作用（PPI）网络，并筛选了核心靶点。对靶标进行了攫物富集和KEGG通路分析，并构建了“MET加剧DA靶通路”网络。使用薛定谔Maestro 13.5软件进行分子对接，以确定MET与目标蛋白的结合自由能和结合模式。WB检测到胃肠肌组织中NOS1和3-硝酸酪氨酸蛋白的表达。ELISA检测到3-硝酸酪氨酸蛋白在腓肠肌组织中的表达。免疫组化（IHC）检测到NOS1在腓肠肌组织中的定位。进行了16S rDNA基因测序以检测粪便中微生物群的结构变化。结果：网络毒理分析结果揭示了共19个交汇蛋白。通过 GO 功能富集和 KEGG 途径分析，发现所获靶点参与分子功能、生物过程和细胞组成，并参与药物代谢——其他酶、过氧化物酶体和核苷酸代谢等通路;基于潜在目标蛋白的晶体结构，分别通过分子对接（XP模式的柔性对接）构建了目标-Met的复杂结构模型，随后进行了MM-GBSA分析。IHC结果表明，Met可以显著促进NOS1从膜区域向细胞质的再分布。WB结果显示，Met能显著促进3-硝酸酪氨酸在糖尿病SD大鼠模型中的表达（P