Sequência de gene codificador para fator de transcrição que confere tolerância a ácido acético a levedura Komagataella phaffii

A superexpressão do fator de transcrição Haa1 aumenta a resistência da levedura Saccharomyces cerevisiae ao ácido acético, um importante ácido carboxílico presente em hidrolisados de biomassa. A superexpressão desse fator de transcrição em outros microrganismos produtores de compostos renováveis a partir de hidrolisados lignocelulósicos pode também favorecer o desempenho fermentativo e a produção dos compostos desejados. Como o gene Haa1 representa um ativo de base biotecnológica, esse conjunto de dados reune a sequência de nucleotídeos do fator de transcrição Haa1 da levedura Komagataella phaffii (sin. Pichia pastoris). Para tanto, a sequência do Haa1 foi identificada, superexpressa e a função validada na levedura. Inicialmente, a sequência proteica de Haa1 foi identificada no genoma da levedura K. phaffii por análises de similaridade com o homólogo de Saccharomyces cerevisiae. Posteriormente, a sequência gênica foi amplificada a partir DNA genômico da levedura e clonada sob controle de dois diferentes promotores constitutivos pGAP e pRPP1b (possui força de cerca de 20% do pGAP). Após transformação da levedura K. phaffii X-33 com os vetores, selecionou-se transformantes por resistência a antibiótico e confirmação da integração do vetor de expressão no genoma da levedura. Finalmente, o desempenho de linhagens recombinantes de K. phaffii superexpressando o fator de transcrição Haa1 foi avaliado na presença de ácido acético e hidrolisado lignocelulósico. A superexpressão de Haa1 conferiu à levedura maior tolerância ao ácido acético entre 4 g/L e 6 g/L reduzindo o tempo de destoxificação em até seis horas e aumentando a produção de biomassa da levedura em até 20%. Os resultados obtidos demonstram a eficiência de K. phaffii Haa1 aumentar a tolerância a ácido acético e abrem caminho para melhorar o desempenho da levedura na produção de compostos renováveis a partir de hidrolisado lignocelulósico.