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基于核酸内切酶的高可及性DNA界面修饰敏感元件过程研究数据

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国家基础学科公共科学数据中心2026-01-30 收录
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https://nbsdc.cn/general/dataDetail?id=683de814195d261233189355&type=1
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数据背景:本研究主要开展生物敏感元件界面定向修饰技术,受启发于自然界中广泛存在的一类具有DNA分子共价结合能力的核酸酶,我们针对解决重要生物识别元件DNA的定向界面修饰问题,开发了基于核酸内切酶的高可及性DNA界面修饰技术。通过系统的生物化学与生物分子学实验,我们获得了一系列关键科学数据。 数据内容:DNA-蛋白自连接核酸酶的表达、纯化与筛选;自连接核酸酶与底物核酸分子反应特性验证;自连接核酸酶固相结合能力测试与评估;自连接核酸酶介导特异性识别DNA分子界面修饰及目标分子识别。其次,我们建立了基于TC1-DNA界面修饰技术的核酸检测试纸条,完成了对多种病原核酸标志物的检测,主要研究和数据内容包括:TC1介导的DNA修饰金纳米颗粒;新冠病毒N基因、H1N1和H3N2侧流层析试纸条的构建与测试数据。 采集方案:通过文献调研,选择构建11种具有潜在核酸结合能力的核酸结合酶分子,序列来源于NCBI、UniProt和GenBank数据库。采用分子生物技术将基因序列通过同源重组连接至pET28a或pET32载体中,通过SDS-PAGE验证蛋白表达与纯度。采用SDS-PAGE、荧光探针分析和表征自连接核酸酶与底物核酸分子反应特性;采用ELISA、原子力显微镜、石英晶体微天平(QCM)等测试自连接核酸酶固相结合能力;通过荧光标记和DNA杂交反应、DNA适配体-蛋白识别反应评估的构建的DNA分子界面的目标识别能力。基于TC1-DNA界面修饰技术的核酸检测试纸条研究,主要采用透射电镜、动态光散射、紫外吸收光谱等表征金纳米颗粒及其表面DNA修饰;采用本项目研制的便携式检测仪读取试纸条信号。 数据大小:111.68 MB
提供机构:
中国科学院武汉病毒研究所
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