การพัฒนาวิธี real-time PCR สำหรับการตรวจ HLAB* 27 ในผู้บริจาคเลือดคนไทย
收藏DataCite Commons2023-09-29 更新2025-04-16 收录
下载链接：
http://doi.nrct.go.th/?page=resolve_doi&resolve_doi=10.14457/TU.the.2022.925
下载链接
链接失效反馈官方服务：
资源简介：
ยีน human leukocyte antigen (HLA) class I, B locus, allele 27 หรือเรียกว่า HLA-B*27 เป็นหนึ่งในปัจจัยเสี่ยงที่พบว่า มีความสัมพันธ์อย่างมากกับกลุ่มของโรคไขข้ออักเสบเรื้อรัง Spondyloarthropathies (SpAs) ปัจจุบันจึงมีการตรวจ HLA-B27 ในงานประจำเพื่อการวินิจฉัยของโรคกลุ่มดังกล่าว การศึกษานี้มีวัตถุประสงค์เพื่อพัฒนาวิธี fluorogenic real-time PCR เปรียบเทียบกับวิธีพีซีอาร์เอสเอสพี ในการตรวจหาอัลลีล HLA-B*27 ในกลุ่มผู้บริจาคเลือดคนไทย ตัวอย่างดีเอ็นเอของผู้บริจาคเลือดคนไทยจากห้องปฏิบัติการธนาคารเลือดโรงพยาบาลธรรมศาสตร์เฉลิมพระเกียรติจำนวน 391 ตัวอย่าง พัฒนาชุดตรวจด้วยวิธี real-time PCR เพื่อตรวจหาอัลลีล HLA-B*27 จากนั้นเปรียบเทียบผลการตรวจสอบอัลลีลดังกล่าวกับวิธีพีซีอาร์เอสเอสพี นอกจากนี้ ตรวจสอบความไวของชุดตรวจด้วยวิธี real-time PCR ที่พัฒนาขึ้นด้วยการใช้ตัวอย่างดีเอ็นเอควบคุมที่พบและไม่พบอัลลีล HLA-B*27 ที่ความเข้มข้นตั้งแต่ 0.001-100 ng/µL สำหรับกลุ่มตัวอย่างที่ตรวจพบอัลลีล HLA-B*27 จะนำมาทดสอบหา HLA-B27 subtypes บริเวณ exon 2 และ 3 ของยีน HLA-B ด้วยวิธี DNA sequencing ผลการศึกษาการตรวจสอบชุดตรวจอัลลีล HLA-B*27 ด้วยวิธี real-time PCR ที่พัฒนาขึ้นด้วยกลุ่มดีเอ็นเอควบคุมพบว่า ให้ผลการทดสอบสอดคล้องกับการตรวจด้วยวิธีพีซีอาร์เอสเอสพีทุกราย (100%) ความไวของการตรวจพบว่า สามารถให้ผลการตรวจอัลลีล HLA-B*27 ได้ถูกต้องด้วยการใช้ตัวอย่างดีเอ็นเอความเข้มข้นตั้งแต่ 1 ng/µL สำหรับกลุ่มตัวอย่างดีเอ็นเอผู้บริจาคเลือดจำนวน 391 ราย พบว่า ตรวจพบอัลลีล HLA-B*27 จำนวน 24 ราย (6.14%; 95% CI, 3.97–9.00) ในขณะที่ไม่พบอัลลีล HLA-B*27 จำนวน 367 ราย (93.86%; 95% CI, 91.00–96.03) และกลุ่มผู้บริจาคเลือดที่ตรวจพบอัลลีล HLA-B*27 เมื่อนำมาตรวจยืนยัน HLA-B27 subtype ด้วยวิธี DNA sequencing พบว่า อัลลีล HLA-B*27:06 ตรวจพบบ่อยที่สุด รองลงมาพบอัลลีล HLA-B*27:04, HLA-B*27:05 และ HLA-B*27:07 ตามลำดับ กล่าวโดยสรุป การตรวจหาอัลลีล HLA-B*27 ด้วยวิธี real-time PCR ที่พัฒนาขึ้นพบว่าดีกว่าเมื่อเปรียบเทียบกับการตรวจด้วยวิธีพีซีอาร์เอสเอสพี ซึ่งวิธีนี้สามารถตรวจได้รวดเร็ว แม่นยำ เชื่อถือได้ และมีความไวสูง นอกจากนี้ วิธีการตรวจที่พัฒนาขึ้นสามารถใช้ในการตรวจวินิจฉัยผู้ป่วยโรคกลุ่ม SpA ในระยะเริ่มต้นเพื่อช่วยในการบรรเทาและรักษาผู้ป่วยกลุ่มนี้ได้
提供机构：
มหาวิทยาลัยธรรมศาสตร์
创建时间：
2023-09-29
