การคัดแยกแบคทีเรียและการพัฒนาหัวเชื้อเพื่อการย้อมคราม

งานวิจัยนี้มีวัตถุประสงค์เพื่อคัดแยกแบคทีเรียที่มีประสิทธิภาพต่อกระบวนการย้อม อินดิโกเพื่อประยุกต์ใช้กับกระบวนการย้อมอินดิโกแบบธรรมชาติ จากการคัดแยกแบคทีเรียในน้ำย้อมอินดิโกพบแบคทีเรีย 18 ไอโซเลท เมื่อทำการทดสอบประสิทธิภาพของแบคทีเรียที่สามารถสังเคราะห์อินดิโกพบแบคทีเรีย 5 ไอโซเลท ได้แก่ SKTU2, SKTU4, SKTU8, SKTU15 และ SKTU16 โดยพบว่าระยะเวลาในการบ่มแปรผันตรงกับปริมาณอินดิโกที่เกิดขึ้น หลังจากนั้นนำอินดิโกที่ได้วิเคราะห์ด้วยเทคนิค UV-visible spectrophotometry โครมาโตกราฟีแบบแผ่นบาง และ Fourier transform infrared (FTIR) spectroscopy พบว่าอินดิโกที่ได้จากแบคทีเรียทั้ง 5 ไอโซเลท มีค่าการดูดกลืนแสงสูงสุด ค่าระยะทางที่สารเคลื่อนที่ต่อระยะทางที่ตัวทำละลายเคลื่อนที่ (Rf) และโครงสร้างของหมู่ฟังก์ชันคล้ายคลึงกับอินดิโกมาตรฐาน จากการศึกษาตัวอย่างเซลล์แบคทีเรียไอโซเลท SKTU16 ด้วยเทคนิค Synchrotron-based Fourier transforms infrared microspectroscopy พบการเปลี่ยนรูปของโปรตีน Amide I ของ beta-sheet เพิ่มขึ้นภายในเซลล์แบคทีเรียที่บ่มกับสารละลายอินดิแคน ซึ่งแตกต่างจากเซลล์แบคทีเรียที่ไม่ได้บ่มกับสารละลายอินดิแคน และเมื่อนำแบคทีเรียทั้ง 18 ไอโซเลท มาศึกษาความสามารถในการรีดิวซ์อินดิโกเป็นลิวโคอินดิโก พบแบคทีเรียเพียง 2 ไอโซเลท คือ SKTU3 และ SKTU4 ที่ให้ค่าความเข้มของสีผ้า (K/S) สูงสุดเท่ากับ 7.75 และ 7.13 ตามลำดับ การระบุสายพันธุ์ของแบคทีเรียที่มีประสิทธิภาพด้วยเทคนิคทางชีวเคมี และทางชีวโมเลกุลพบว่าแบคทีเรียส่วนใหญ่จัดอยู่ในกลุ่ม Bacillus sp. เมื่อนำแบคทีเรียไอโซเลท SKTU4 และ SKTU16 ผ่านกระบวนการทำแห้งแบบเยือกแข็งโดยมีมอลโทเดกซ์ทรินและกลีเซอรอลเป็นสารป้องกันความเย็นพบว่ามีอัตราการรอดชีวิตเท่ากับ 47.86 และ 66.66 เปอร์เซ็นต์ ตามลำดับ โดยแบคทีเรียไอโซเลท SKTU16 ให้ประสิทธิภาพในการสังเคราะห์อินดิโกเท่ากับ 2.96 มิลลิกรัมต่อลิตร และแบคทีเรียไอโซเลท SKTU4 ให้ประสิทธิภาพในการรีดิวซ์อินดิโกเท่ากับ 6.42 ไม่แตกต่างอย่างมีนัยสำคัญเมื่อเปรียบเทียบกับแบคทีเรียที่ไม่ผ่านกระบวนการทำแห้ง