Cas9外切酶融合蛋白数据集

CRISPR-Cas9 诱导的染色体结构变化机制仍然知之甚少，并且没有有效的策略来抑制这些副产物的产生。我们发现高水平易位的产生依赖于 Cas9 对靶向位点的重复切割。因此，我们采用了一种策略，将 Cas9 与优化后的 TREX2 融合以产生 Cas9TX，这是一种 Cas9 外切核酸酶，可抑制完美的DNA 修复，从而避免重复切割。与CRISPR-Cas9相比，CRISPR-Cas9TX大大抑制了易位水平，提高了单位点编辑的编辑效率。与 Cas9TX 相关的大片段缺失数量也减少到非常低的水平。 CRISPR-Cas9TX 在嵌合抗原受体 T 细胞中能应用于多重基因编辑，并几乎消除了有害的染色体易位。在这里，我们报告了Cas9 诱导的易位机制，并提出了一种减少CRISPR-RNA引导的核酸内切酶诱导染色体异常的新型通用策略。