Bioprospecção de compostos de baixo peso molecular com atividade antileucêmica em peçonha de Bothrops moojeni

A leucemia é um dos tipos de câncer de maior incidência em todo o mundo, sendo a LMA considerada a mais letal entre elas. Infelizmente, tem sido observado aumento da sua incidência ao longo do tempo, o que reflete a preocupação científica na busca por terapias alternativas. Atualmente, uma das linhas de pesquisa de destaque é a busca por compostos naturais com atividade terapêutica, sendo a peçonha de serpentes uma excelente matriz, uma vez que apresenta diversos compostos com diferentes atividades biológicas. As desintegrinas são uma classe de peptídeo encontrada na peçonha de serpentes que demonstram ação antitumoral pela interação com as integrinas, receptores de adesão celular essenciais na progressão e desenvolvimento do tumor, inibindo sua atividade. Nesse contexto, o presente projeto realizou a purificação de uma desintegrina de tamanho médio a partir da peçonha de Bothrops moojeni, denominada Moojecin, bem como a caracterização do seu potencial antitumoral em células de LMA (HL-60 e THP-1). A metodologia de isolamento foi feita por HPLC em coluna de fase reversa C18, em duas etapas cromatográficas, obtendo a desintegrina em elevado grau de pureza. A Moojecin não apresentou atividade citotóxica e nem antiproliferativa em THP-1 e HL-60 nas concentrações testadas (16 e 32 μg/ml), mas apresentou atividade antimigratória significativa em ambas as linhagens, além dE inibir a angiogênese no ensaio de formação de tubos no Matrigel de forma dose dependente (32, 16, 8 e 0,8 μg/ml). A avaliação da toxicidade da desintegrina (16 e 32 μg/ml) não provocou hemólise e nem citotoxicidade em PBMC. O estudo de interação com integrinas demonstrou uma interação mais forte com a integrina αVβ3 em comparação com a α5β1 e o ensaio de agregação plaquetária induzida por ADP (0,45 μg/ml) indicou um IC50 de 5,039 μg/ml. A análise por espectrometria de massas demonstrou que a Moojecin apresenta massa molecular de 7417,835 Da e sequência primária de 69 aminoácidos, obtida por sequenciamento N-terminal (degradação de Edman) e espectrometria de massas após digestão tríptica, sendo ela: ECDCGAPENTCCDAATCKLRPGAQCAEGLCCDQCRFMKEGTVCRIARGDDMDDYCNGISAGCPRNPFHA. Esta sequência demonstrou elevado grau de identidade quando comparada a outras desintegrinas descritas na literatura. Assim, o presente estudo é o primeiro relato do isolamento e caracterização funcional e estrutural de uma desintegrina na peçonha da serpente B. moojeni e abre perspectivas para obtenção de uma nova molécula com potencial para auxiliar no tratamento da Leucemia Mieloide Aguda.