硬骨鱼类趋化因子CXCL10具有免疫调节和杀菌的双重功能

我们从牙鲆中鉴定并克隆了趋化因子CXCL10（命名为PoCXCL10）并对其功能进行了研究。PoCXCL10在结构上含有一个自由延伸的N端、三个β片层和C端的α螺旋。正常生理条件下，PoCXCL10在多个组织中有不同水平的表达。E. tarda感染后，肝脏、脾脏和头肾中PoCXCL10的表达显著上调。重组rPoCXCL10蛋白（rPoCXCL10）能够以剂量依赖的方式在体外诱导牙鲆外周血白细胞（PBLs）迁移，并促进细胞因子IL-6、CXCL8、IL-1β、TNF-α和IL-10的表达。rPoCXCL10能够结合革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌，并抑制E. tarda、海豚链球菌Streptococcus iniae、鳗弧菌Vibrio anguillarum和哈维氏弧菌Vibrio harveyi的生长。此外，rPoCXCL10对V. anguillarum和V. harveyi具有直接的杀菌活性。为了研究PoCXCL10功能的结构依赖性，我们构建了一个缺少C端α-螺旋区域的PoCXCL10突变体蛋白，rPoCXCL10M。实验结果表明，rPoCXCL10M和rPoCXCL10都能结合牙鲆PBLs，且rPoCXCL10M的趋化活性与rPoCXCL10相当。然而，rPoCXCL10M的杀菌活性显著低于rPoCXCL10，说明C端α-螺旋区域对体外杀菌活性至关重要。体内实验结果表明，rPoCXCL10和rPoCXCL10M可显著减少E. tarda和V. anguillarum在牙鲆组织中的传播和定殖。