鲤科疱疹病毒3未在EPC细胞中复制，但在S期介导细胞周期停滞

EPC（Epithelioma Papulosum Cyprini）细胞系广泛用于培养各种水生动物病毒。然而，先前的研究报告说，EPC 细胞不允许 CyHV-3 复制。本研究将CyHV-3接种到EPC细胞中，进行细胞病变效应（CPE）观察，PCR和定量实时PCR用于病毒基因检测和载量定量，电子显微镜可视化病毒粒子形成，转录组测序（RNA-seq）探索感染机制，流式细胞术评估细胞周期改变。结果表明，CyHV-3感染的EPC细胞在感染后24 h、48 h、72 h、96 h、7 d和14 d均未表现出CPE。虽然在细胞沉淀中检测到病毒 DNA 和即早 （IE）、早期 （E） 和晚期 （L） 基因的转录本，但在上清液或游离部分中均未发现病毒基因和 cDNA。RT-qPCR证实，所有时间点的病毒载量均较低（<10³拷贝/5ng），透射电镜未观察到病毒粒子，共同表明存在潜伏感染。感染后 96 小时对 EPC 细胞进行转录组学分析，鉴定出 607 个差异表达基因 （DEG）。GO 富集将这些 DEG 分为生物过程 （BP）、分子功能 （MF） 和细胞成分 （CC），主要与细胞区室、结合、代谢过程、催化活性和生物调节有关。KEGG通路分析显示，甾醇生物合成、细胞周期、萜类骨架合成和DNA复制富集。流式细胞术显示，CyHV-3感染诱导EPC细胞S期停滞，停滞种群随时间增加。这些发现表明，CyHV-3可能通过调节宿主细胞周期相关基因表达来建立潜伏期。